Momento del cambio de cultivo en un medio secuencial y el desarrollo temprano de embriones ovinos in vitro

Abstract

La eficiencia de la producción de embriones in vitro es baja. Probablemente uno de los factores en esta baja eficiencia es el tiempo al cual se realiza el cambio de cultivo en un medio secuencial. El objetivo de este estudio fue estimar el tiempo óptimo para el cambio de cultivo en un medio secuencial. Un total de 1352 ovocitos calidad uno obtenidos de ovarios de ovejas sacrificadas en rastro fueron asignados aleatoriamente a uno de tres tratamientos: T1 (n=414) medio Cleavage durante las primeras 48 h y medio Blastocyst 120 h de cultivo; T2 (n=421) medio Cleavage las primeras 60 h y Blastocyst las 108 h restantes; T3 (n=517) medio Cleavage las primeras 72 h y Blastocyst las siguientes 96 h. El diseño experimental fue un completamente al azar donde la unidad experimental fue el embrión. Los ovocitos fueron madurados en medio TCM 199 y fertilizados en medio Talp-Hepes. Las variables evaluadas fueron desarrollo, tamaño y calidad embrionaria. Los resultados fueron analizados mediante un análisis de varianza o regresión logística, según tipo de variable. El porcentaje de mórulas fue diferente (P=0.0005) entre tratamientos (60.63, 73.39 y 66.92%) para T1, T2, T3, respectivamente), mientras que el porcentaje de blastocistos fue mayor (P=0.0001) en el T2 (32.54%) vs (13.77 y 16.63%, para T1, y T3, respectivamente). El tamaño de los embriones determinado en fase de mórula compacta fue diferente (P=0.016) entre T2 y T3 (149.60 ± 8.5 vs 145.56 ± 7.8 µm) y T1 (146.8 ± 6.1 µm) fue similar a T2 y T3. No se observaron diferencias entre tratamientos (P=0.89) en la calidad morfológica de los embriones. En conclusión el tiempo óptimo para realizar el cambio de cultivo en el medio secuencial usado bajo las condiciones de este estudio es a las 60 h.