Caracterización molecular y crioconservación de semillas de Chysis bractescens Y Rhyncholaelia glauca

Abstract

En México, Orchidaceae ocupa el tercer lugar a nivel familia con alrededor de 1,260 especies y 170 géneros. Su importancia recae en su uso como plantas de ornato y en su papel en la dinámica y diversidad de los ecosistemas. Muchas de ellas se encuentran amenazadas, como Chysis bractescens Lindl. (1840) Y otras tienen un alto potencial económico como Rhynchoaelia glauca (Lindl.) Schltr. (1918). Uno de los objetivos de este estudio fue el de obtener la huella genómica de ambas especies por medio de marcadores moleculares de tipo ISSR con fines de protección vegetal. A partir de hojas jóvenes se realizó la extracción de ADN con el método CTAB. La amplificación fue mediante el uso de 15 iniciadores tipo ISSR y para visualizarlas, se amplificaron en un gel de agarosa al 2 %. El polimorfismo general obtenido fue de 96.5 % y el análisis de agrupamiento permitió separar correctamente a las plantas muestreadas a nivel de especie. La mayor variabilidad genética (51.96 %) se presentó dentro de las especies y el índice de diversidad de Shannon-Weaver estimado fue de 5.11. El segundo objetivo consistió en la evaluación de la viabilidad de semillas después de ser crioconservadas en nitrógeno líquido durante 1 hora, previo mantenimiento de éstas en condiciones ambientales durante 6 meses. Las semillas fueron pretratadas con cuatro disoluciones crioprotectoras y una solución de carga. Fueron sumergidas en nitrógeno líquido y después se tiñeron con cloruro 2,3,5-trifeniltetrazolio (CTT) al 2 %. Los resultados indicaron que el tratamiento de semillas sin ninguna disolución, presentó un 82 % y 58.2 % para Ch. bractescens y R. glauca respectivamente. demostrándose que, los marcadores ISSRs resultan de utilidad para la obtención de sus huellas genómicas, y que las semillas pueden ser crioconservadas.