Cuantificación de los genes quitinasa y fenilalanina amonio liasa (PAL) en plantas de jitomate (Solanum lycopersicum L.) tratados con bioprotectores

Abstract

El cultivo de jitomate tiene gran cantidad de plagas, entre las que se incluyen bacterias, virus, hongos e insectos. Cuando la planta es atacada por estos patógenos se activan sus mecanismos de defensa. La aplicación de un tipo de substancia bioprotectora puede inducir la producción de genes relacionados a la patogénesis los cuales protegen a las plantas contra patógeno y estrés biótico de diferente tipo. Se sembraron plantas de jitomate de la variedad SUN F1 en charolas de unicel, a los 20 días fueron trasplantadas 5 plantas en cada maceta, el sustrato usado fue Peat moss y agrolita en una proporción 2:1. Se realizaron 3 aplicaciones de 2500 ppm de bioprotectores, en total fueron 6 tratamientos. Los productos que se usaron fueron Oxycom Prep Plus seco (T1), Protecto RZH (T2), Oxycom Prep Plus seco+ Protecto RZH (T3), Oxycom Ag (T4) y Oxycom Prep Plus (T5), se usó agua como testigo (T6). Los riegos se realizaron cada tercer día con solución nutritiva Steiner 50%. Se tomaron muestras compuestas de hoja de cada maceta, las cuales se lavaron con agua destilada. Se obtuvo RNA total utilizando el protocolo de extracción de RNA con Trizol. La calidad y cantidad del RNA se cuantificó y verificó en un ND 1000 Spectrophotometer. Posteriormente se realizó la síntesis de cDNA utilizando el kit ImProm IITM Reverse Transcription System. La Q-PCR se realizó con un termociclador tiempo real BIO RAD CFX96™, como endógeno se usó el gen GADPH y el fluoróforo fue FAM. Se realizó el análisis de la información y se obtuvieron los valores de expresión génica con el método ddCt. La aplicación de bioprotectores indujo en plantas de jitomate mayor expresión de genes de quitinasa y PAL, la mezcla de dos de ellos, Oxycom Pre Plus Seco más Protecto RZH fue la que mejor estimulo la expresión en PAL y para el caso de quitinasa el mejor tratamiento fue Oxycom Pre Plus.