Regeneración por organogénesis y transformación genética de tomate (Solanum lycopersicum L.)

Abstract

El cultivo in vitro ha permitido el desarrollo de la ingeniería genética al asegurar la regeneración de plantas transformadas. El objetivo de la presente investigación fue diseñar un protocolo eficiente de regeneración por organogénesis que permita obtener plantas transformadas de cinco genotipos de tomate. Se probaron dos medios para regeneración (MR1 y MR2) y dos para enraizamiento (ME1 y ME2), basados en sales Murashige y Skoog al 100 %. El balance de reguladores fue para MR1: 0.9 mg·L-1 BA + 0.02 mg·L-1 ANA; para MR2: 2.5 mg·L-1 BA + 1.0 mg·L-1 AIA; para ME1: 0.02 mg·L-1 ANA + 0.02 mg·L-1 BA; y para ME2: 1.0 mg·L-1 BA + 2.5 mg·L-1 AIA. En la regeneración in vitro se observó desarrollo de brotes 14 días después de la siembra. El mejor medio, MR2, generó entre 6.2 y 4.0 brotes por explante. En el enraizamiento el ME2 mostro desarrollo de raíces en 100 % de brotes. Durante la etapa de aclimatación la sobrevivencia fue mayor de 97 % en todas las líneas. Se probó la efectividad de la cepa LBA4404 con el vector p35GUSint para la transformación; sin embargo, no se detectó expresión del gen reportero GUS.