Conservación in vitro bajo condiciones de crecimiento lento y estabilidad genética de crisantemo (Dendranthema grandiflor kitam.)

Abstract

Se probaron diferentes condiciones para la conservación in vitro en crecimiento lento de plántulas de crisantemo. Los cultivos se incubaron en medio MS bajo dos temperaturas (4 °C y 25 °C) y dos azúcares-alcoholes (sorbitol y manitol) como fuentes de carbono. La reducción del crecimiento y 100 % de sobrevivencia de las plántulas durante 10 meses se logró al añadir 2 o 4% de sorbitol al medio de cultivo, con temperatura de 4 °C luz tenue fría y fotoperiodo 16/8 h (luz/obscuridad). Después del periodo de conservación las plantas se recuperaron y desarrollaron normalmente en medio MS sin hormonas, suplementado con 30g l -1 de sacarosa. Al emplear manitol se obtuvieron plántulas de menor tamaño pero se redujo el porcentaje de sobrevivencia. A fin de determinar la estabilidad genética de las plántulas tras el tratamiento de conservación se realizó un análisis con la técnica de RAPDs, los resultados mostraron que no hubo diferencias genéticas entre la planta madre y las plántulas conservadas. El protocolo establecido en éste trabajo se empleó exitosamente en la conservación y posterior recuperación de dos líneas transgénicas de la variedad Indianápolis, de la variedad Hartmann y 12 líneas transgénicas derivadas de ésta.