Regeneración por embriogénesis somática y agroinfección de trigo (Triticum aestivum L.)
Regeneración por embriogénesis somática y agroinfección de trigo (Triticum aestivum L.)
Date
2017-06
Authors
Ramos Hernández, César
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Universidad Autónoma Chapingo
Abstract
El trigo es uno de los cultivos alimenticios
más importantes en el mundo. En México
es el tercer grano cultivado de importancia.
En el futuro habrá que incrementar la
producción de esta gramínea para
satisfacer una mayor demanda y para
enfrentar los efectos del cambio climático.
Para este fin, la biotecnología proporciona
un conjunto de herramientas como el
mejoramiento genómico, la ingeniería
genética y más recientemente la edición
genética. La ingeniería genética para la
generación de plantas transgénicas
requiere de protocolos eficientes de
regeneración mediante el cultivo in vitro,
como pre-requisito para el proceso de
transformación genética. En este trabajo
se desarrollaron protocolos para la
regeneración eficiente de dos variedades
de trigo (Rebeca F2000 y Kronstad F2004)
mediante embriogenésis somática
inducida a partir de embriones maduros.
La inducción de callo embriogénico se
obtuvo en un medio MS con vitaminas
Gamborg (MSG) o vitaminas MS (MSMS)
con 0.5 mg L-1 de 2-4D y 2.4 mg L-1 de
Picloram, bajo incubación en obscuridad
por cinco semanas. La brotación de los
embriones, se logró en medio MSG con
0.2 mg L-1 de 2-4D y 1.0 mgL-1 Tidiazurón
para la variedad Rebeca F2000,
obteniendo hasta 14.8 brotes por explante
en promedio, mientras que para la
variedad Kronstad se empleó el medio
MSMS con 0.2 mg L-1 2-4D y 2.0 mgL-1
Tidiazuron, logrando hasta 8.4 brotes por
explante. La brotación se llevó a cabo bajo
fotoperíodo de 16 horas de luz y 8 de
obscuridad y los brotes se obtuvieron en
dos semanas. El enraizamiento y la adaptación ex vitro también pudo lograrse
de manera eficiente. Se determinó la
cantidad de agente selectivo (sorbitol,
NaCl, kanamicina y fosfinotricina) a
emplear durante la transformación para
ambas variedades, así como la mayor
infectividad de la cepa EHA105 (pGUSint)
sobre la GV3101(pGUSint) y la LBA4404
(pGUSint) en la variedad Kronstad.
Description
Tesis (Maestría en Ciencias en Biotecnología Agrícola)