Plantas transgénicas de crisantemo que acomulan trehalosa muestran tolerancia a estrés biótico y abiótico

Date
2015-06
Authors
Cuellar Olalde, Rocio
Journal Title
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Publisher
Universidad Autónoma Chapingo
Abstract
Resulta posible incrementar la acumulación endógena de trehalosa y la tolerancia a factores bóticos (patógenos) así como a factores abióticos (particularmente estrés hídrico) al sobre-expresar los genes de biosíntesis de este azúcar. En éste trabajo se analizó por un lado, la tolerancia a estrés hídrico y vida post-cosecha de plantas de crisantemo var. Harman transformadas por agroinfección con la construcción pBINRd29A::ScTPS1TPS2::NOS y por otro lado, la tolerancia al hongo Puccinia horiana en plantas transgénicas var. Indianápolis pBIN35S::ScTPS1TPS2::NOS. Se recuperaron 16 líneas transformadas con el promotor Rd29A, con resistencia a kanamicina, mientras que los genes de biosíntesis de la trehalosa TPS y TPP se detectaron por RT-PCR. Después de medir la acumulación de trehalosa por HPLC bajo condiciones no inducibles (crecimiento a 26 °C) e inducibles (crecimiento a 4 °C por 48 h), se seleccionaron tres líneas para una caracterización más exhaustiva. La acumulación de trehalosa bajo condiciones inducidas fue de 27.5, 76.25, 62.5 y 52.5 g/g de peso fresco para la línea no transformante (NT) var. Harman, la línea Rd18, Rd10 y Rd8, respectivamente. Las plantas se llevaron hasta la floración y se evaluó la vida post-cosecha, encontrándose que mientras que la variedad NT alcanzó la senescencia a los 10 días, las líneas Rd8, Rd10 y Rd18, a los 20 días aún mostraban turgencia en el florero. Las líneas transgénicas también mostraron mayor tolerancia a la sequía, a la deshidratación en hojas y finalmente a un complejo de hongos que se identificó aquí. Por otro lado, transformantes var. Indianápolis (35S 19 y 35S-8) mostraron tolerancia al hongo Puccinia horiana.
Description
Tesis (Maestría en Ciencias en Biotecnología Agrícola)
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