Patógenos asociados, frecuencia de aislamiento, y efecto de la inoculación secuencial en la expresión de síntomas de marchitez de chile

Abstract

La marchitez del chile reduce significativamente el rendimiento, lo que induce a los agricultores a cambiar de cultivo o abandonar las tierras agrícolas que están infestadas con los patógenos asociados. Aunque en general Phytophthora capsici se ha asociado a la enfermedad en las regiones del centro de México, más patógenos se han asociado a las enfermedad, pero sus efectos interactivos sobre la gravedad de la enfermedad se desconoce. El objetivo de esta investigación fue evaluar la coexistencia de estos patógenos y el desarrollo de síntomas de la enfermedad en chile. Con el fin de determinar los hongos y oomicetos asociados a la marchitez de chile, se realizaron muestreos de julio a noviembre de 2013 y 2014 en Yurécuaro, Vista Hermosa y Tanhuato municipalidades en Michoacán, México. Los aislamientos se realizaron en el laboratorio en un medio V8 y PDA. De 200 muestras procesadas en el laboratorio 45% correspondió a Fusarium sp., el 30%, P. capsici 10% a Rhizoctonia solani, 4% a Pythium y el 11% a los patógenos no identificados previamente asociados marchitez. La identificación se realizó a nivel molecular a través de la extracción de DNA total de hongos usando el método de CTAB 2%. Las amplificaciones por PCR de la región correspondiente al ITS se realizaron mediante ITS5 y NL4. Los fragmentos amplificados fueron verificados por electroforesis horizontal y se secuenciaron utilizando la metodología de Sanger. La presencia de Fusarium oxysporum, F. solani, Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani, Pythium sp. y Plectosphaerella cucumerina, se comparó con las secuencias depositadas en la base de datos GenBank. Esta es la primera vez que P. cucumerina se ha identificado y asociado con la marchitez del chile en Michoacán, México. Posteriormente se llevaron a cabo las pruebas de patogenicidad y ensayos de inoculación secuencial con cepas seleccionadas de Phytophthora capsici, Fusarium oxysporum y P. cucumerina y se confirmó que P. cucumerina, Fusarium oxysporum y Phytophthora capsici son patógenos del chile Jalapeño y Anaheim.